Colored stacking

Description
Cette vidéo est réalisée à partir d'un empilement de 25 coupes (ou tranches) observées en microscopie confocale au travers d'un cyste, qui est un assemblage creux de cellules épithéliales dans un gel de protéines (matrigel). Pour chaque coupe on peut voir 3 couleurs qui correspondent à des marquages différents: en bleu l'ADN qui révèle les noyaux des cellules, en vert la GFP-actinine, et en rouge la podocalyxine, marquant la membrane délimitant la lumière de ce mini-organe. La quatrième image est la superposition des trois marquages. C'est un voyage de 5 secondes au travers d'une structure d'une quarantaine de microns d'épaisseur!

La danse de saint guy

Embryon d'oursin au stade larvaire (72h)
- Marquage du squelette avec l'Anticorps 1d5 dilué au 1/25e et un anticorps secondaire IgM anti mouse Cy3 dilué au 1/100e
- Marquage de l'endoderme avec l'anticorps 5C7 dilué au 1/10e et un anticorps secondaire IgG anti mouse Cy5
Stack tous les 1µm réalisé sur un confocal SP5
Reconstitution image 3D par Christian Rouvière

Voyage au centre du tissu adipeux

Voyage au centre du tissu adipeux : exploration de la vascularisation d'un tissu adipeux entier grace à la méthode de clarification.

Making contacts in the brain

Contact du neurone présynaptique rouge sur l'élément post-synaptique d'un autre neurone en vert.

Ghost in the cell


Une protéine de fusion entre une protéine intravésiculaire et la GFP photoactivable est exprimée dans des MDCK. La GFP est activée par un éclairage sur une petite zone bien délimitée, puis suivie au cours du temps (5min, délai 3s)

Copépode ou monstre ?

Sameh Benaicha

Copépode en 3D - lbdv Villefranche sur mer - CNRS
Grossissement : 10X
Système : microscope open spim
Type d'échantillon : Echantillon fixé
Information sur le marquage : Autofluorescence de type GFP, (excitation 488nm/émission 505-545nm)
Contexte technique/biologique : mise en route du microscope Open Spim du lbdv - Etude de l'auto-fluorescence des Copépodes.
Post-processing appliqué à l'image : Construction 3D avec Imaris

Alien des mers

Sameh Benaicha

Copépode en 3D - lbdv Villefranche sur mer - CNRS
Grossissement : 10X
Système : microscope open spim
Type d'échantillon : Echantillon fixé
Information sur le marquage : Autofluorescence de type GFP, (excitation 488nm/émission 505-545nm)
Contexte technique/biologique : mise en route du microscope Open Spim du lbdv - Etude de l'auto-fluorescence des Copépodes.
Post-processing appliqué à l'image : Construction 3D avec Imaris

Golgi Tsunami

Cellules RPE-1 exprimant de manière stable le domaine PH de la protéine OSBP en fusion avec la GFP. L’acquisition d'images en timelapse se fait à 37°C avec un microscope plein-champs Olympus IX83 à 3.5 images/min pendant 50 min. La drogue PIK93 (inhibiteur de PI4-kinase III-beta) est injectée dans le milieu à une concentration finale de 500 nM. La barre d'échelle est de 20 µm. Le domaine PH d'OSBP est un senseur spécifique de phosphoinositide PI4P à la surface du réseau trans-golgien (TGN). Le PI4P est produit par deux PI4-kinases à la surface du TGN (II-alpha et III-beta) et OSBP consomme le PI4P en échange de cholestérol. Lorsque la kinase III-beta (proche d’OSBP) est inhibée, seule la II-alpha (éloignée d’OSBP) produit du PI4P. Des ondes oscillantes périodiques sont alors observées : elles traduisent les mouvements de la protéine OSBP en quête de ces zones riches en PI4P à la surface du TGN.

Birth of centrosome’s love

Kelly Daniel LBDV
Modélisation 3D du coté animal de l'ascidie lors de la 4éme division cellulaire de son développement.
Modélisation faite avec le logiciel Imaris.
On peut voir les centrosomes, l'ADN et les membranes.

Astral Firework

Janet Chenevert LBDV
Ascidian embryo expressing EB3::Venus which binds to plus ends of microtubules. Timelapse acquisition of 4 cells during mitosis. Leica SP5 confocal, 40x oil objective, images every 1 second.

L'union fait la force mais la division fait la vie !

Marianne Roca LBDV

Divide and multiply

Margaux Failla LBDV
Ascidian embryo expressing fluorescent proteins targetted to DNA and membranes. The film shows 8 to 64 cell stages, focussing on the unequal cleavages which form the 2 small germ cells (bottom center). Confocal Leica SP8, 40x water objective. Timelapse acquisition at 1 minute intervals.

Marine Sputnik

Pluteus larvae of sea urchins are planctonic organisms that display an amazing 8-armed structure. This marine ship carries a little baby sea urchin that will emerge during the metamorphosis. The pluteus eats little algeas and swims in the sea using multiples ciliated cell. Here is a 3D schematic representation of a pluteus larva, compiled from several in vivo, confocal and SPIM microscopy observations.

Eclosion de larve de Phallusia mammillata

Remi Dumollard LBDV
éclosion d'un têtard d'ascidie Phallusia mammillata -
time lapse movie (dt=2') en multi-Z - Brigth field image
Grossissement : X400 (objectif 40X)
SYSTÈME : Zeiss - Axiovert 200
Type d'échantillon : embryon vivant d'ascidie Phallusia mammillata
Information sur le marquage : pas de marquage, contraste par pseudo-DIC
Information sur l'image : l'origine et le role des cellules qui se deplacent sur la larve sont completement inconnus
Contexte biologique : contexte naturel, l'embryon est dans de l'eau de mer naturelle à l'intérieur de son chorion (equivalent coquille) avant d'eclore.
Post-processing appliqué à l'image : pas de post processing, vitesse accélérée 2000 fois.

Lymph Node is coming

Ganglions entier de souris, fixé puis transparisé

Danse hypnotique de l'anémone...

L'acquisition a été réalisée sur la plateforme de microscopie du C3M (Centre méditerranéen de Médecine Moléculaire) située à Nice.
Il s'agit d'un échantillon vivant de l'anémone Aiptasia pallida, filmée vue du pied en fluorescence GFP. Il n'y a pas de marquage fluorescent. La fluorescence observée provient de l'auto-fluorescence des symbiotes (algues) de l'anémone.

Le vidéomicroscope utilisé est un LEICA AM-TIRF équipé d'une chambre thermostatée à atmosphère contrôlé (http://www.unice.fr/c3m/wp-content/uploads/2015/07/Leica-AM-TIRF_Fiche-descriptive.pdf).
Objectif 2.5x0.07 DRY.
Cadence: 1 image par 0,335s.
Post processing: recadrage sur la zone d'intérêt.

Nom de la vidéo: "Danse hypnotique de l'anémone..."

Rodolphe PONTIER-BRES
Centre Scientifique de Monaco
Equipe "Ecosystémes et Immunité" de Dorota CZERUCKA.

Peace & Love or Together for a symbol

EGF-Alexa 555 endocytosis in two very close BSC1-CAAXGFP cells