Golgi Tsunami

Cellules RPE-1 exprimant de manière stable le domaine PH de la protéine OSBP en fusion avec la GFP. L’acquisition d'images en timelapse se fait à 37°C avec un microscope plein-champs Olympus IX83 à 3.5 images/min pendant 50 min. La drogue PIK93 (inhibiteur de PI4-kinase III-beta) est injectée dans le milieu à une concentration finale de 500 nM. La barre d'échelle est de 20 µm. Le domaine PH d'OSBP est un senseur spécifique de phosphoinositide PI4P à la surface du réseau trans-golgien (TGN). Le PI4P est produit par deux PI4-kinases à la surface du TGN (II-alpha et III-beta) et OSBP consomme le PI4P en échange de cholestérol. Lorsque la kinase III-beta (proche d’OSBP) est inhibée, seule la II-alpha (éloignée d’OSBP) produit du PI4P. Des ondes oscillantes périodiques sont alors observées : elles traduisent les mouvements de la protéine OSBP en quête de ces zones riches en PI4P à la surface du TGN.
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